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N-糖基化修饰组
N-糖基化(N-Glycosylation)是最重要的蛋白质翻译后修饰之一,主要在复杂的多细胞或组织形成过程中起关键作用,参与细胞与细胞的连接、受体配体的相互作用、免疫应答、细胞凋亡及各种发病机理等生物学过程。拜谱生物N-糖基化蛋白质修饰组,利用凝集素富集N-糖基化肽段,高通量,高分辨,可分析不同实验条件下糖基化蛋白质组变化及信号通路,以及候选糖蛋白标志物的筛选等。
N-糖基化修饰组
原理/实验流程
碳水化合物子个人的复杂的性和成千上万N-glycoproteins低展示能力会让对N-glycosylation构造的分析策略的陈述相当很难。在监测低丰度的N糖基化遮盖球淀粉酶酶或肽段时,这当中掺入大量的未遮盖的球淀粉酶酶肽断,这很易于将低丰度的糖基化遮盖球淀粉酶酶肽段的表现掩藏。凝素亲和法是近年来糖球淀粉酶酶质组学中应运范围广泛的分开生物富集策略。凝集素(lectin)不是类糖根据球淀粉酶酶质,能爱情专一辨认某一些特俗构造的单糖或聚糖中相应的糖基队列而与之根据,我们与糖链不可逆转非共价根据,糖球淀粉酶酶或糖肽被凝集素捕捉到后续,平常用相应的单糖经由竞争力根据凝集素将糖球淀粉酶酶或糖肽洗刷出来了。 胆固醇酶质經過酶解后采用凝集素(lectin)生物富集N-糖基化肽段,其次用N-糖酰胺酶(PNGase)在H218O中切掉接入在天冬酰胺残基(Asn)上的糖链。该办理迫使Asn氧团伙量添加2.9890Da。然后用高误差LC-MS质谱仪检查脱糖后的肽段,通过信息检索数据深入分析库,询问脱糖后氧团伙量与它基本方式氧团伙量的变化规律并且糖基化表达肽段的队列,然后选定该胆固醇酶质的N-糖基化位点。N-糖基化位点选定往后,再采用label-free的方式对其通过降钙素原检测深入分析。

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产品特色
  • 01大规模的蛋白质组N-糖基化位点的鉴定与分析

  • 02采用凝集素特异性富集N-糖基化肽段
  • 03高通量,高分辨

应用方向
  • 01
    不同实验条件下糖基化蛋白质组变化及信号通路分析

  • 02
    筛选候选糖蛋白标志物


送样建议
样本类型 常规送样量
植物叶片 湿重≥3g
植物根茎、木质部、韧皮部等 湿重≥5g
细胞样品 细胞量湿重≥5*10^7
组织样品 人、动物、微生物湿重≥50mg
体液样品 血清、血浆体积≥200μl,脑脊液≥500μl,尿液≥1000μl
参考文献
1、Zielinska DF, Gnad F, Schropp K, Wi?niewski JR, Mann M. Mapping N-glycosylation sites across seven evolutionarily distant species reveals a divergent substrate proteome despite a common core machinery. Mol Cell. 2012;46(4):542-548. doi:10.1016/j.molcel.2012.04.031
有关系物料
蛋白鉴定,蛋白质组,多肽组学,靶向蛋白质,修饰蛋白质组,代谢组,非靶代谢,靶向代谢,医学全靶代谢,植物广靶代谢,测序,转录组,基因组,微生物组,ncRNA,IP-seq,生信分析
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